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近日，我司貝康諾®優(yōu)生優(yōu)育遺傳病攜帶者篩查項(xiàng)目，篩查出1例脆性X綜合征基因突變女性攜帶者和1例血友病基因突變女性攜帶者，兩種遺傳病均屬于X連鎖隱性遺傳病。X連鎖隱性遺傳病一直有著“傳男不傳女”的稱號(hào)，由于致病基因位于母親的一條X染色體上，因此與完全正常的男性生育后代時(shí)，男孩將有1/2的幾率成為患者，女孩僅有1/2的幾率成為攜帶者。常見的X連鎖隱性遺傳病有紅綠色盲、血友病、假肥大性肌營(yíng)養(yǎng)不良等。
第一例女性攜帶者既往有自然流產(chǎn)史，備孕進(jìn)行體檢時(shí)發(fā)現(xiàn)了卵巢早衰的現(xiàn)象，為了提前做好優(yōu)生優(yōu)育工作并排查該患者的卵巢早衰現(xiàn)象是否由于攜帶脆性X綜合征突變基因?qū)е?，在醫(yī)生的建議下該患者進(jìn)行了貝康諾®優(yōu)生優(yōu)育遺傳病基因攜帶者篩查。檢測(cè)結(jié)果顯示該患者攜帶脆性X綜合征的雜合突變，突變信息如下：
補(bǔ)充說(shuō)明：雜合突變是指對(duì)于常染色體或者女性X染色體上的突變位點(diǎn)，檢測(cè)到正常等位基因和突變等位基因同時(shí)存在。
??受檢樣本FMR1基因雜合突變數(shù)據(jù)圖：
脆性X綜合征（Fragile X Syndrome, FXS）是僅次于唐氏綜合征之外最主要導(dǎo)致兒童智力低下的遺傳病，屬于X連鎖隱性遺傳。男性發(fā)病率約為1/1500，女性發(fā)病率約為1/4000，因細(xì)胞中X染色體末端在特殊培養(yǎng)基中經(jīng)誘變劑作用后可顯示如同斷裂的脆性部位而得名。超過(guò)99%的脆性X染色體綜合征患者是由FMR1基因三核苷酸CGG重復(fù)順序擴(kuò)增和超甲基化所致。
FMR1基因根據(jù)（CGG）n重復(fù)序列的擴(kuò)增程度，可分為四種基因型，由于基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)的改變，不同的基因型有不同的臨床表現(xiàn)。正常人群的CGG重復(fù)范圍為6-44，FMR1基因表達(dá)正常，無(wú)臨床表現(xiàn)。CGG重復(fù)數(shù)在45-55者為中間型，無(wú)臨床表現(xiàn)。CGG重復(fù)數(shù)在55-200者為前突變，具有發(fā)生脆性X相關(guān)震顫/共濟(jì)失調(diào)綜合征（FXTAS）的風(fēng)險(xiǎn)，與女性卵巢儲(chǔ)備功能下降、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、卵巢功能早衰、不孕不育、體外受精失敗有關(guān)。CGG重復(fù)數(shù)超過(guò)200者為全突變，男性患者及部分女性患者將生活無(wú)法自理，終生無(wú)法治愈。
精準(zhǔn)檢測(cè)CGG重復(fù)數(shù)是區(qū)分不同類型患者的重要依據(jù)，我司通過(guò)專項(xiàng)特殊熒光PCR技術(shù)精準(zhǔn)篩查FMR1 基因55重以內(nèi)的CGG 重復(fù)數(shù)突變；大于55重的將再使用美國(guó)Amplide X公司試劑盒（已獲歐洲CE-IVD認(rèn)證）進(jìn)行二次驗(yàn)證，并且明確重復(fù)數(shù)。檢測(cè)流程快速準(zhǔn)確，只需要少量基因組DNA，針對(duì)致病DNA片段區(qū)域設(shè)計(jì)特異檢測(cè)熒光探針，通過(guò)PCR擴(kuò)增，再經(jīng)毛細(xì)管電泳檢測(cè)及生物信息學(xué)分析，即可精確估算FMR1基因的CGG三核苷酸串聯(lián)重復(fù)的長(zhǎng)度。
脆性X綜合征患者其學(xué)習(xí)能力及社會(huì)適應(yīng)能力都嚴(yán)重受損，目前沒有可以治愈的方法，現(xiàn)階段僅能通過(guò)藥物控制臨床癥狀改善生活質(zhì)量，或是通過(guò)行為干預(yù)和語(yǔ)言訓(xùn)練改善部分病情。因此，通過(guò)孕前產(chǎn)前及時(shí)篩查并進(jìn)行遺傳咨詢能夠有效避免患兒的出生。2010年美國(guó)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)和基因組學(xué)學(xué)會(huì)(AmericanCollege of Medical Genetics and Genomics , ACMG)指南建議對(duì)原因不明的發(fā)育遲緩、智力低下和各種孤獨(dú)癥患者的一線檢測(cè)是染色體微陣列和脆性X綜合征基因檢測(cè)。
前突變拓展為全突變的傳遞一般都來(lái)源于母親。攜帶前突變基因的女性有50%的幾率將突變傳遞給下一代，轉(zhuǎn)變成全突變的概率與前突變（CGG）n重復(fù)的大小有關(guān)。研究顯示（CGG）n重復(fù)90次以上，轉(zhuǎn)變成全突變的概率接近100%。
病例中的女性患者正是由于攜帶FMR1基因前突變才出現(xiàn)了卵巢早衰的現(xiàn)象并具有自然流產(chǎn)史，因此對(duì)于具有相關(guān)癥狀（發(fā)育遲緩、孤獨(dú)癥、卵巢早衰、遲發(fā)性小腦共濟(jì)失調(diào)和震顫、不明原因智力障礙）的孕婦以及有生育意愿的女性，建議及時(shí)進(jìn)行脆性X綜合征致病基因的篩查。該女性患者CGG重復(fù)數(shù)為64，在生育時(shí)極易把該突變傳遞給下一代，若下一代男性有攜帶，則易發(fā)生意識(shí)性震顫、小腦共濟(jì)失調(diào)、腦白質(zhì)損傷等，而若下一代是女性攜帶者，則易發(fā)生卵巢早衰、40歲前閉經(jīng)等。因此，該女性需進(jìn)行充分遺傳咨詢后再考慮何種生育方式來(lái)避免患兒的出生。
第二例女性攜帶者在孕中進(jìn)行產(chǎn)前篩查時(shí)檢測(cè)出血友病F8基因大片段缺失，檢測(cè)出該突變后我司對(duì)該孕婦的羊水進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)了同樣的大片段缺失，即該孕婦已將突變傳遞給了胎兒。孕婦羊水檢測(cè)具體突變信息如下：
??受檢樣本F8基因片段缺失數(shù)據(jù)圖：
??正常樣本數(shù)據(jù)圖：
血友?。℉emophilia）是一種凝血功能障礙性疾病，由于凝血因子編碼基因突變導(dǎo)致凝血因子功能缺陷，呈X染色體隱性遺傳模式。其主要臨床表現(xiàn)為關(guān)節(jié)、肌肉和深部組織出血，也可有胃腸道、泌尿道、中樞神經(jīng)系統(tǒng)出血以及受傷、拔牙或手術(shù)后滲血時(shí)間延長(zhǎng)，傷口完全愈合前出血延遲或復(fù)發(fā)等，其嚴(yán)重程度取決于相應(yīng)凝血因子的凝血活性。 血友病又分為血友病A（甲型血友病）和血友病B (乙型血友病)。血友病A由F8基因突變引起凝血因子Ⅷ缺陷，約占血友病的80~85%，發(fā)病率為1/5000新生男嬰；而血友病B由F9基因突變引起凝血因子Ⅸ缺陷所致，約占血友病的15~20%，發(fā)病率約為1/25000新生男嬰。
病例中的女性攜帶者F8基因出現(xiàn)大片段缺失突變將會(huì)引起凝血因子Ⅷ的缺陷。目前血友病的治療仍然以輸注凝血因子等方法為主，作為一種伴隨終生的遺傳性疾病，及時(shí)進(jìn)行干預(yù)意義重大。本例女性攜帶者的羊水中檢測(cè)出了同樣類型的突變，值得慶幸的是胎兒為女性，一般只是血友病的攜帶者，不需要進(jìn)一步采取干預(yù)措施。但該女胎長(zhǎng)大成人，需要生育下一代時(shí)，也需進(jìn)行產(chǎn)前診斷或選擇三代試管的方式來(lái)避免血友病男性患兒的出生。若該孕婦以后想生育二胎或三胎也都需做好產(chǎn)前診斷，若該突變片段遺傳給了男胎，為了避免較為嚴(yán)重血友病患兒的出生，則需要終止妊娠。另外，部分?jǐn)y帶血友病基因突變的女性有發(fā)生異常出血的風(fēng)險(xiǎn)，因此該孕婦需盡早檢測(cè)其凝血因子水平，與其產(chǎn)檢的主治醫(yī)生協(xié)商，制定最佳的分娩方案。
X連鎖隱性遺傳病缺乏明確的家族史，女性往往為攜帶者，難以察覺，通過(guò)常規(guī)的產(chǎn)前和孕前體檢也難以檢測(cè)出，一旦生育男孩那么生育患兒的幾率高達(dá)1/2，因此針對(duì)X連鎖隱性遺傳病的孕前、產(chǎn)前基因檢測(cè)仍需引起教育和重視。
